ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਕਾਰਕ

ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤਿਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਕੁਝ ਦਖਲ ਦੇ ਕਾਰਕ ਅਕਸਰ ਆਉਂਦੇ ਰਹਿੰਦੇ ਹਨ.
ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਬਹੁਤ ਹੀ ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਸਭ ਤੋਂ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਕਾਰਕਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਤਿਆਰ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ.
ਬਰਾਬਰ ਨਾਜ਼ੁਕ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਸਰੋਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਗਲਤ-ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਵੱਲ ਵੱਧਦੇ ਹਨ. ਜੇ ਪੀਸੀਆਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ ਇਕ ਜਾਂ ਵਧੇਰੇ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹਿੱਸੇ ਜਾਂ ਅਸਪਸ਼ਟ ਪਛਾਣ ਨੂੰ ਆਪਣੇ ਆਪ ਰੋਕ ਲਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਨਿਦਾਨ ਵਿਚ ਰੁਕਾਵਟ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ. ਇਹ ਘਟੀ ਹੋਈ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਤੇ ਗਲਤ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ.
ਰੋਕਥਾਮ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ ਨੱਕਾਂ ਵਾਲੇ ਨਿ nuc ਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਖਾਤਿਕਤਾ ਦਾ ਨੁਕਸਾਨ ਸਕਣ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਤੇ / ਜਾਂ ਭੰਡਾਰਨ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ. ਖਾਸ ਕਰਕੇ, ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਜਾਂ ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਸਟੋਰੇਜ ਸੈੱਲਾਂ ਅਤੇ ਨਿ nuc ਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦਾ ਨੁਕਸਾਨ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ. ਸੈੱਲ ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਫਿਕਸੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਪੈਰਾਫਿਨ ਏਮਬਿੰਗਡਿੰਗ ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜੇ ਅਤੇ ਨਿਰੰਤਰ ਸਮੱਸਿਆ ਦੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਕਾਰਨ ਹਨ (ਅੰਕੜੇ 1 ਅਤੇ 2) ਦੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਕਾਰਨ ਹਨ. ਇਨ੍ਹਾਂ ਮਾਮਲਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਇੱਥੋਂ ਤੱਕ ਕਿ ਅਨੁਕੂਲ ਇਕੱਲਤਾ ਵੀ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਸਹਾਇਤਾ ਨਹੀਂ ਕਰੇਗੀ.

ਚਿੱਤਰ 1 | ਡੀਐਨਏ ਇਕਸਾਰਤਾ 'ਤੇ ਅਚੱਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ
ਅਗਾਅਰਜ਼ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਰੇਸਿਸ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਆਟੋਫਿਨ ਦੇ ਪੈਰਾਫਿਨ ਭਾਗਾਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਕਾਫ਼ੀ ਹੱਦ ਤਕ ਵੱਖਰੀ ਹੈ. ਫਿਕਸੇਸ਼ਨ ਵਿਧੀ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਕੱ ractions ਣ ਦੇ ਵੱਖੋ ਵੱਖਰੇ ਹਿੱਸੇ ਦੇ ਕੱ ractions ਣ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਵਿੱਚ ਡੀ ਐਨ ਏ ਮੌਜੂਦ ਸੀ. ਡੀ ਐਨ ਏ ਨੂੰ ਸਿਰਫ ਤਾਂ ਹੀ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਜਦੋਂ ਜੱਦੀ ਜੰਮਿਆ ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ ਬਫਰਲ ਨਿਰਪੱਖ ਰਸਮੀ ਤੌਰ ਤੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ. ਇੱਕ ਜ਼ੋਰਦਾਰ ਐਸਿਡਿਕ ਬੋਇਨ ਫਿਕਸੇਟਿਵ ਜਾਂ ਅਸੁਰੱਖਿਅਤ, ਬਣਤਰ ਐਸਿਡ-ਰੱਖਣ ਵਾਲੇ ਫਾਰਮਿਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਡੀ ਐਨ ਏ ਦੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਘਾਟੇ ਵਿੱਚ. ਬਾਕੀ ਬਚੇ ਹਿੱਸੇ ਬਹੁਤ ਖੰਡਿਤ ਹਨ.
ਖੱਬੇ ਪਾਸੇ, ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਕਿਲੋਬੈਸ ਜੋੜੀ (ਕੇਬੀਪੀ) ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਗਟ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ

ਚਿੱਤਰ 2 | ਨਿ nuc ਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਟੀਚਿਆਂ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ ਦਾ ਨੁਕਸਾਨ
(ਏ) ਦੋਵਾਂ ਤਾਰਾਂ 'ਤੇ 3'-5' ਪਾੜੇ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਟੀਚੇ ਦੇ ਡੀ ਐਨ ਏ ਵਿਚ ਬਰੇਕ ਹੋਣਗੇ. ਡੀਐਨਏ ਦਾ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਅਜੇ ਵੀ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜੇ ਤੇ ਆ ਜਾਵੇਗਾ. ਹਾਲਾਂਕਿ, ਜੇ ਇੱਕ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਐਂਨੀਲਿੰਗ ਸਾਈਟ ਡੀ ਐਨ ਏ ਡਰੇਗਮੈਂਟ ਤੇ ਗੁੰਮ ਹੈ, ਸਿਰਫ ਲੀਨੀਅਰ ਸਹਾਇਕਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ. ਸਭ ਤੋਂ ਅਨੁਕੂਲ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ, ਟੁਕੜੇ ਇਕ ਦੂਜੇ ਨੂੰ ਮੁੜ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਉਪਜ ਦੇ ਛੋਟੇ ਅਤੇ ਹੇਠਾਂ ਖੋਜ ਦੇ ਪੱਧਰ ਹੋਣਗੇ.
. ਲੰਮੇ ਵਾਰਮਿੰਗ ਪੜਾਅ ਦੌਰਾਨ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮੈਟ੍ਰਿਕਸ ਡੀ ਐਨ ਏ ਤੋਂ ਦੂਰ ਹੋ ਜਾਣਗੇ ਅਤੇ ਘੱਟ ਸਖਤ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਵੀ ਦਲੇਰ ਨਹੀਂ ਹੋਣਗੇ.
(ਸੀ) ਨਾਲ ਲੱਗਦੇ ਥਾਈਮਾਈਨ ਬੇਸਾਂ ਟੀਟੀ ਡਾਈਰ ਬਣਦੀਆਂ ਹਨ.
ਇਕ ਹੋਰ ਆਮ ਸਮੱਸਿਆ ਜੋ ਅਕਸਰ ਅਣੂ ਵੋਲਕੂਲਰ ਨਿਦਾਨ ਵਿਚ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਉਹ ਫੈਨੋਲ-ਕਲਲੋਰੋਫਾਰਮ ਕੱ raction ਣ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਨਿ ute ਲਿਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਘੱਟ ਤੋਂ ਘੱਟ ਅਨੁਕੂਲ ਰੀਲਿਜ਼ ਹੁੰਦੀ ਹੈ. ਅਤਿਅੰਤ ਮਾਮਲਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਇਹ ਝੂਠੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਾਲ ਜੁੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ. ਸੈੱਲ ਦੇ ਮਲਬੇ ਦੇ ਪਾਬੰਦੀਆਂ ਦੇ ਲੀਸਿਸ ਜਾਂ ਪਾਚਕ ਹਜ਼ਮ ਦੇ ਕਾਰਨ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਸਮਾਂ ਬਚਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਇਹ ਵਿਧੀ ਅਕਸਰ ਘੱਟ ਪੀ.ਆਰ.ਸੀ.ਆਰ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਘੱਟ ਪੀ.ਆਰ.ਆਰ.ਟੀ.

ਅਸਪਸ਼ਟਤਾ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕਣਾ

ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਰੋਕ ਦੇ ਕੰਟੇਨਰ ਸੰਕਲਪ ਵਜੋਂ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਉਨ੍ਹਾਂ ਕਾਰਕਾਂ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਸਾਰੇ ਕਾਰਕਾਂ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਕੰਟੇਨਰ ਸੰਕਲਪ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ. ਸਖਤੀ ਨਾਲ ਬਾਇਓਕੈਮੀਕਲ ਅਰਥ ਵਿਚ, ਰੋਕ ਲਗਾਉਣ ਵਾਲੀ ਪਾਚਕ ਦੀ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲਤਾ ਤੱਕ ਸੀਮਿਤ ਹੈ, ਭਾਵ, ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ ਜਾਂ ਇਸ ਦੇ ਕੋਫੈਕਟਰ ਲਈ ਘਟਾਓਣਾ-ਉਤਪਾਦ ਰੂਪਾਂਤਰਣ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਐਮਜੀ 2 + ਲਈ).
ਨਮੂਨੇ ਜਾਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਬਫਰ ਅਤੇ ਪ੍ਰਵੇਸ਼ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਭਾਗਾਂ ਵਿੱਚ ਭਾਗਾਂ ਨੂੰ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਾਚਕ ਜਾਂ ਟਰੈਪ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਇਸ ਦੇ ਕੋਲੇਮੀਟਰ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਬਦਲੇ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਘੱਟ ਨਕਾਰਾਤਮਕ pr ਹਮਲਿਆਂ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹੋ.
ਹਾਲਾਂਕਿ, ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਦੇ ਭਾਗਾਂ ਅਤੇ ਟਾਰਗੇਟ ਵਾਲੇ ਨਿਗਮ ਵਾਲੇ ਨਿ news ਕਲੀਕੈਟਸ ਵਾਲੇ ਕੰਪਨੀਆਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਬਦਲਾਅ ਵੀ 'ਪੀ.ਆਰ.ਆਰ. ਇਨਿਹਿਬਟਰ' ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਮਨੋਨ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ. ਇਕ ਵਾਰ ਜਦੋਂ ਸੈੱਲ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ ਇਕੱਲਤਾ ਦੁਆਰਾ ਵਿਘਨ ਪਾਉਂਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਨਿ nuc ਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਜਾਰੀ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ ਇਸ ਦੇ ਆਲੇ ਦੁਆਲੇ ਦੇ ਹੱਲ ਅਤੇ ਠੋਸ ਪੜਾਅ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਗੱਲਬਾਤ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ. ਉਦਾਹਰਣ ਦੇ ਲਈ, 'scvengers' ਗੈਰ-ਸਹਿਯੋਗੀ ਆਪਸੀ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦੁਆਰਾ ਇੱਕੱਲ-ਜਾਂ ਡਬਲ-ਫਸੇ DNA ਨੂੰ ਬੰਨ੍ਹ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਆਖਰਕਾਰ ਟੀਕੇਜਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਨੂੰ ਘਟਾ ਕੇ ਇਕੱਲਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਿੱਚ ਵਿਘਨ ਪਾ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜੋ ਆਖਰਕਾਰ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਾਲੇ ਭਾਂਡੇ ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਸਕਦੇ ਹਨ.
ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਪੀਸੀਆਰ ਇਨਿਹਿਬਟਰਜ਼ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਸਰੀਰ ਦੇ ਤਰਲ ਪਦਾਰਥਾਂ ਅਤੇ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ), ਖੁਰਾਕ ਪੂਰਕ, ਗਲੋਕੋਜਨ, CA2 + ਮੀਂਹ, CA2 + ਮੈਟਸ) ਅਤੇ ਹਿੱਸੇ (ਵਰਤੋਲੇ ਮੈਟਲ) ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ

ਵਧੇਰੇ ਪ੍ਰਚਲਿਤ ਪੀਸੀਆਰ ਇਨਿਹਿਬਟਰਜ਼ ਬੈਕਟਰੀਆ ਅਤੇ ਯੂਕੇਰੀਓਟਿਕ ਸੈੱਲਾਂ, ਨਾਨ-ਟਾਰਗੇਟ ਡੀਐਨਏ, ਟਿਸ਼ੂ ਮੈਟ੍ਰੋਮੈਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਉਪਕਰਣਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਦਸਤਾਨੇ ਅਤੇ ਪਲਾਸਟਿਕਾਂ ਵਿੱਚ ਪਾਏ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ. ਐਕਸਪਲਿਕ ਐਸਿਡ ਦਾ ਸ਼ੁੱਧਤਾ
ਅੱਜ, ਕਈ ਆਟੋਮੈਟਿਕ ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਉਪਕਰਣ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਦਸਤਾਵੇਜ਼ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਨੂੰ ਬਦਲ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਪਰ 100% ਰਿਕਵਰੀ ਅਤੇ ਟੀਚਿਆਂ ਦਾ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਕਦੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ. ਸੰਭਾਵਿਤ ਇਨਿਹਿਬਟਰਸ ਵੀ ਸ਼ੁੱਧ ਨਿ nec ਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜਾਂ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ ਕਿ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਲਾਗੂ ਹੋ ਗਿਆ ਹੈ. ਇਨਿਹਿਬਟਰਜ਼ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਵੱਖਰੀਆਂ ਰਣਨੀਤੀਆਂ ਮੌਜੂਦ ਹਨ. ਉਚਿਤ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਦੀ ਚੋਣ ਨੇ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ 'ਤੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪਾ ਸਕਦੇ ਹਨ. ਪੀਸੀਆਰਜੀ ਦੀ ਰੋਕਥਾਮ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਹੋਰ ਸਾਬਤ ਕੀਤੇ ਗਏ .ੰਗਾਂ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਧਾ ਰਹੀਆਂ ਹਨ ਜਾਂ ਬੀਐਸਏ ਵਰਗੀਆਂ ਇਸ਼ਾਰੇ ਨੂੰ ਲਾਗੂ ਕਰ ਰਹੀਆਂ ਹਨ.
ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੇ ਕੁਆਲਿਟੀ ਕੰਟਰੋਲ (ਆਈਪੀਸੀ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੁਆਰਾ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ.
ਐਕਸ ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਕਿੱਟ ਵਿਚ ਸਾਰੇ ਰੀਐਡੈਂਟਾਂ ਅਤੇ ਹੋਰ ਹੱਲਾਂ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਧਿਆਨ ਰੱਖਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਈਥੇਨੌਲ, ਏ.ਡੀ.ਏ.ਏ. ਏ.ਟੀ.ਏ., ਲਾਇਲਿਕ ਐਸਿਡ ਅਲੱਗ ਅਲੱਗ ਅਲੱਗ ਅਲੱਗ ਅਲੱਗ ਅਲੱਗ ਅਲੱਗ ਹੈ. ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਿਆਂ, ਉਹ ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਸਰਗਰਮ ਜਾਂ ਸਰਗਰਮ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ.