ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮਾਂ ਵਿੱਚ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਦੇ ਕਾਰਕ

ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਕੁਝ ਦਖਲ ਦੇਣ ਵਾਲੇ ਕਾਰਕ ਅਕਸਰ ਸਾਹਮਣੇ ਆਉਂਦੇ ਹਨ।
ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਪੀਸੀਆਰ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਸਭ ਤੋਂ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਕਾਰਕਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਹ ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਬਰਾਬਰ ਨਾਜ਼ੁਕ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਰੋਤ ਹਨ ਜੋ ਗਲਤ-ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਜੇ ਪੀਸੀਆਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ ਇੱਕ ਜਾਂ ਇੱਕ ਤੋਂ ਵੱਧ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹਿੱਸੇ ਜਾਂ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਆਪਣੇ ਆਪ ਵਿੱਚ ਰੋਕੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਜਾਂ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਪਰਖ ਵਿੱਚ ਰੁਕਾਵਟ ਆ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਨਾਲ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਘਟ ਸਕਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਗਲਤ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਵੀ ਨਿਕਲ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਰੋਕ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਸ਼ਿਪਿੰਗ ਅਤੇ/ਜਾਂ ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਕਾਰਨ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ ਦਾ ਨੁਕਸਾਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਜਾਂ ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਸਟੋਰੇਜ ਸੈੱਲਾਂ ਅਤੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡਾਂ ਨੂੰ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਸੈੱਲ ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਫਿਕਸੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਪੈਰਾਫਿਨ ਏਮਬੈਡਿੰਗ ਡੀਐਨਏ ਫਰੈਗਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਇੱਕ ਲਗਾਤਾਰ ਸਮੱਸਿਆ ਦੇ ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਕਾਰਨ ਹਨ (ਚਿੱਤਰ 1 ਅਤੇ 2 ਦੇਖੋ)।ਇਹਨਾਂ ਮਾਮਲਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਅਨੁਕੂਲ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵੀ ਮਦਦ ਨਹੀਂ ਕਰੇਗੀ.
ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜਾ

ਚਿੱਤਰ 1 |ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ 'ਤੇ ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ
ਐਗਰੋਜ਼ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਆਟੋਪਸੀਜ਼ ਦੇ ਪੈਰਾਫਿਨ ਭਾਗਾਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਕਾਫ਼ੀ ਵੱਖਰੀ ਹੈ।ਨਿਰਧਾਰਨ ਵਿਧੀ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਔਸਤ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਕੱਡਣ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਸਨ।ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਉਦੋਂ ਹੀ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਜਦੋਂ ਮੂਲ ਜੰਮੇ ਹੋਏ ਨਮੂਨਿਆਂ ਅਤੇ ਬਫਰਡ ਨਿਊਟ੍ਰਲ ਫਾਰਮਲਿਨ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇੱਕ ਜ਼ੋਰਦਾਰ ਤੇਜ਼ਾਬੀ ਬੋਇਨ ਫਿਕਸਟਿਵ ਜਾਂ ਬਿਨਾਂ ਬਫਰ ਕੀਤੇ, ਫਾਰਮਿਕ ਐਸਿਡ-ਰੱਖਣ ਵਾਲੇ ਫਾਰਮਲਿਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਡੀਐਨਏ ਦਾ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਨੁਕਸਾਨ ਹੋਇਆ।ਬਾਕੀ ਬਚਿਆ ਹਿੱਸਾ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਖੰਡਿਤ ਹੈ।
ਖੱਬੇ ਪਾਸੇ, ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਕਿਲੋਬੇਸ ਜੋੜਿਆਂ (kbp) ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਈ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ
ਚਿੱਤਰ 2 |ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਟੀਚਿਆਂ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ ਦਾ ਨੁਕਸਾਨ
(a) ਦੋਨਾਂ ਸਟ੍ਰੈਂਡਾਂ 'ਤੇ 3′-5′ ਗੈਪ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਟੀਚੇ ਦੇ DNA ਵਿੱਚ ਵਿਘਨ ਪਵੇਗਾ।ਡੀਐਨਏ ਦਾ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਅਜੇ ਵੀ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜੇ 'ਤੇ ਹੋਵੇਗਾ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਜੇਕਰ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜੇ 'ਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਐਨੀਲਿੰਗ ਸਾਈਟ ਗੁੰਮ ਹੈ, ਤਾਂ ਸਿਰਫ ਰੇਖਿਕ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਸਭ ਤੋਂ ਅਨੁਕੂਲ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ, ਟੁਕੜੇ ਇੱਕ-ਦੂਜੇ ਨੂੰ ਮੁੜ-ਸੰਤੁਸ਼ਟ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਪੈਦਾਵਾਰ ਛੋਟੇ ਅਤੇ ਖੋਜ ਪੱਧਰਾਂ ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੋਵੇਗੀ।
(b) ਬੇਸਾਂ ਦਾ ਨੁਕਸਾਨ, ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਡੀਪਿਊਰੀਨੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਥਾਈਮੀਡਾਈਨ ਡਾਇਮਰ ਗਠਨ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਐਚ-ਬਾਂਡਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਅਤੇ ਟੀਐਮ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਵੱਲ ਅਗਵਾਈ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਲੰਬੇ ਵਾਰਮਿੰਗ ਪੜਾਅ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮੈਟਰਿਕਸ ਡੀਐਨਏ ਤੋਂ ਪਿਘਲ ਜਾਣਗੇ ਅਤੇ ਘੱਟ ਸਖ਼ਤ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ ਵੀ ਐਨੀਲ ਨਹੀਂ ਹੋਣਗੇ।
(c) ਨਾਲ ਲੱਗਦੇ ਥਾਈਮਾਈਨ ਬੇਸ ਇੱਕ TT ਡਾਇਮਰ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।
ਇੱਕ ਹੋਰ ਆਮ ਸਮੱਸਿਆ ਜੋ ਅਕਸਰ ਮੌਲੀਕਿਊਲਰ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕਸ ਵਿੱਚ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਉਹ ਹੈ ਫਿਨੋਲ-ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਟੀਚੇ ਦੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਘੱਟ-ਅਨੁਕੂਲ ਰੀਲੀਜ਼।ਅਤਿਅੰਤ ਮਾਮਲਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਇਸ ਨੂੰ ਝੂਠੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਬਹੁਤਾ ਸਮਾਂ ਉਬਾਲ ਕੇ ਲਾਈਸਿਸ ਜਾਂ ਸੈੱਲ ਦੇ ਮਲਬੇ ਦੇ ਪਾਚਕ ਪਾਚਨ ਦੁਆਰਾ ਬਚਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਇਹ ਵਿਧੀ ਅਕਸਰ ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਰੀਲੀਜ਼ ਦੇ ਕਾਰਨ ਘੱਟ ਪੀਸੀਆਰ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।

ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਰੋਕਥਾਮ

ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਇਨਿਬਿਸ਼ਨ ਨੂੰ ਉਹਨਾਂ ਸਾਰੇ ਕਾਰਕਾਂ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਕੰਟੇਨਰ ਸੰਕਲਪ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜੋ ਸਬ-ਓਪਟੀਮਲ ਪੀਸੀਆਰ ਨਤੀਜਿਆਂ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਸਖਤੀ ਨਾਲ ਬਾਇਓਕੈਮੀਕਲ ਅਰਥਾਂ ਵਿੱਚ, ਰੋਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਤੱਕ ਸੀਮਿਤ ਹੈ, ਭਾਵ, ਇਹ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਜਾਂ ਇਸਦੇ ਕੋਫੈਕਟਰ (ਉਦਾਹਰਣ ਵਜੋਂ, ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਲਈ Mg2+) ਦੀ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਸਾਈਟ ਨਾਲ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੁਆਰਾ ਸਬਸਟਰੇਟ-ਉਤਪਾਦ ਦੇ ਪਰਿਵਰਤਨ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਜਾਂ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।
ਨਮੂਨੇ ਵਿਚਲੇ ਹਿੱਸੇ ਜਾਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਬਫਰਾਂ ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਵਾਲੇ ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰੋਕ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜਾਂ ਇਸਦੇ ਕੋਫੈਕਟਰਾਂ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ EDTA) ਨੂੰ ਫਸ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਨੂੰ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਬਦਲੇ ਵਿਚ ਘਟੇ ਜਾਂ ਗਲਤ ਨਕਾਰਾਤਮਕ PCR ਨਤੀਜੇ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਹਾਲਾਂਕਿ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਹਿੱਸਿਆਂ ਅਤੇ ਟੀਚੇ ਵਾਲੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਵੀ 'ਪੀਸੀਆਰ ਇਨਿਹਿਬਟਰਜ਼' ਵਜੋਂ ਮਨੋਨੀਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਇਕ ਵਾਰ ਸੈੱਲ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ ਨੂੰ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਕਰਕੇ ਵਿਘਨ ਪਾਉਣ ਅਤੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਨੂੰ ਛੱਡਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਆਲੇ ਦੁਆਲੇ ਦੇ ਘੋਲ ਅਤੇ ਠੋਸ ਪੜਾਅ ਵਿਚਕਾਰ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, 'ਸਕੈਵੇਂਜਰਸ' ਗੈਰ-ਸਹਿਯੋਗੀ ਪਰਸਪਰ ਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦੁਆਰਾ ਸਿੰਗਲ- ਜਾਂ ਡਬਲ-ਸਟੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਬੰਨ੍ਹ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਟੀਚਿਆਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਨੂੰ ਘਟਾ ਕੇ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਿੱਚ ਦਖਲ ਦੇ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜੋ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਾਲੇ ਜਹਾਜ਼ ਤੱਕ ਪਹੁੰਚਦੇ ਹਨ।
ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਪੀਸੀਆਰ ਇਨਿਹਿਬਟਰਜ਼ ਕਲੀਨਿਕਲ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਟੈਸਟਾਂ (ਪਿਸ਼ਾਬ ਵਿੱਚ ਯੂਰੀਆ, ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਅਤੇ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਹੈਪਰੀਨ), ਖੁਰਾਕ ਪੂਰਕ (ਜੈਵਿਕ ਹਿੱਸੇ, ਗਲਾਈਕੋਜਨ, ਚਰਬੀ, Ca2+ ਆਇਨ) ਅਤੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਵਿੱਚ ਭਾਗਾਂ (ਫੀਨੋਲਜ਼) ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਸਰੀਰ ਦੇ ਤਰਲਾਂ ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟਾਂ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। , ਭਾਰੀ ਧਾਤਾਂ)

ਇਨਿਹਿਬਟਰਸ

ਸਰੋਤ

ਕੈਲਸ਼ੀਅਮ ਆਇਨ

ਦੁੱਧ, ਹੱਡੀਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ

ਕੋਲੇਜਨ

ਟਿਸ਼ੂ

ਬਾਇਲ ਲੂਣ

ਮਲ

ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ

ਖੂਨ ਵਿੱਚ

ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ

ਖੂਨ ਦੇ ਨਮੂਨੇ

ਹਿਊਮਿਕ ਐਸਿਡ

ਮਿੱਟੀ, ਪੌਦਾ

ਖੂਨ

ਖੂਨ

ਲੈਕਟੋਫੈਰਿਨ

ਖੂਨ

(ਯੂਰਪੀ) ਮੇਲੇਨਿਨ

ਚਮੜੀ, ਵਾਲ

ਮਾਇਓਗਲੋਬਿਨ

ਮਾਸਪੇਸ਼ੀ ਟਿਸ਼ੂ

ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ

ਪੌਦਾ, ਮਲ

ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼

ਦੁੱਧ

ਯੂਰੀਆ

ਪਿਸ਼ਾਬ

Mucopolysaccharide

ਉਪਾਸਥੀ, ਲੇਸਦਾਰ ਝਿੱਲੀ

ਲਿਗਨਿਨ, ਸੈਲੂਲੋਜ਼

ਪੌਦੇ

ਵਧੇਰੇ ਪ੍ਰਚਲਿਤ ਪੀਸੀਆਰ ਇਨਿਹਿਬਟਰਜ਼ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਅਤੇ ਯੂਕੇਰੀਓਟਿਕ ਸੈੱਲਾਂ, ਗੈਰ-ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਡੀਐਨਏ, ਟਿਸ਼ੂ ਮੈਟ੍ਰਿਕਸ ਦੇ ਡੀਐਨਏ-ਬਾਈਡਿੰਗ ਮੈਕਰੋਮੋਲੀਕਿਊਲਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਦੇ ਉਪਕਰਣ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਦਸਤਾਨੇ ਅਤੇ ਪਲਾਸਟਿਕ ਵਿੱਚ ਲੱਭੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਪੀਸੀਆਰ ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਨਿਚੋੜਨ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਜਾਂ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਇੱਕ ਤਰਜੀਹੀ ਢੰਗ ਹੈ।
ਅੱਜ, ਵੱਖ-ਵੱਖ ਆਟੋਮੇਟਿਡ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਉਪਕਰਣ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਮੈਨੂਅਲ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਨੂੰ ਬਦਲ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਪਰ 100% ਰਿਕਵਰੀ ਅਤੇ/ਜਾਂ ਟੀਚਿਆਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਕਦੇ ਵੀ ਪ੍ਰਾਪਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।ਸੰਭਾਵੀ ਇਨ੍ਹੀਬੀਟਰ ਅਜੇ ਵੀ ਸ਼ੁੱਧ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜਾਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਰਣਨੀਤੀਆਂ ਮੌਜੂਦ ਹਨ।ਉਚਿਤ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਚੋਣ ਦਾ ਇਨ੍ਹੀਬੀਟਰ ਗਤੀਵਿਧੀ 'ਤੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪੈ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਰੋਕਥਾਮ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਹੋਰ ਸਾਬਤ ਤਰੀਕਿਆਂ ਵਿੱਚ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣਾ ਜਾਂ ਬੀਐਸਏ ਵਰਗੇ ਐਡਿਟਿਵਜ਼ ਨੂੰ ਲਾਗੂ ਕਰਨਾ ਹੈ।
ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਰੋਕਥਾਮ ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ (ਆਈਪੀਸੀ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਵਿੱਚ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਅਤੇ ਹੋਰ ਹੱਲਾਂ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਧਿਆਨ ਰੱਖਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਈਥਾਨੌਲ, EDTA, CETAB, LiCl, GuSCN, SDS, isopropanol ਅਤੇ phenol, ਨੂੰ ਇੱਕ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਧੋਣ ਦੇ ਕਦਮ ਦੁਆਰਾ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਿਆਂ, ਉਹ ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਸਰਗਰਮ ਜਾਂ ਰੋਕ ਸਕਦੇ ਹਨ।


ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਮਈ-19-2023