中文网站
ਅਣੂਤਮਕ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਵਿੱਚ ਲਾਜ਼ਮੀ ਸੰਦ ਹਨ, ਅਣਉਲਕੂਲਰ ਰਿਸਰਚ ਤੋਂ ਲੈ ਕੇ ਅਰਜ਼ੀਆਂ ਲਈ ਬਿਨੈ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਖੋਜ ਲਈ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਐਕਸਪਲਿਨਕਲ ਨਿਗਾਹਾਂ ਲਈ ਵਧਾਉਣ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦਿੰਦੇ ਹਨ. ਹਾਲਾਂਕਿ, ਕਿਸੇ ਵੀ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਉਪਕਰਣ ਦੀ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਇੱਕ ਪੀਸੀਆਰਐਲਅਲ ਐਨਾਲਾਈਜ਼ਰ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਦਾ ਸਾਹਮਣਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਜੋ ਇਸਦੇ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰਦੇ ਹਨ. ਇਹ ਲੇਖ ਇਸ ਬਾਰੇ ਕੁਝ ਆਮ ਪ੍ਰਸ਼ਨਾਂ ਨੂੰ ਸੰਬੋਧਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈਪੀਸੀਆਰਐਲਏਜ਼ਰਸਮੱਸਿਆ ਨਿਪਟਾਰਾ ਕਰਨਾ ਅਤੇ ਆਮ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਦੇ ਵਿਹਾਰਕ ਹੱਲ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦਾ ਹੈ.
1. ਮੇਰੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਕਿਉਂ ਨਹੀਂ ਵਧਾਉਂਦੀ ਹੈ?
ਟਾਰਗੇਟ ਡੀ ਐਨ ਏ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ ਉਪਭੋਗਤਾਵਾਂ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਸਭ ਤੋਂ ਆਮ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਹੈ. ਇਸ ਦਾ ਕਾਰਨ ਕਈ ਕਾਰਕਾਂ ਨੂੰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ:
ਗਲਤ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ: ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ ਤੁਹਾਡੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਟੀਚੇ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਲਈ ਖਾਸ ਹਨ ਅਤੇ ਇੱਕ ਅਨੁਕੂਲ ਪਿਘਲਣ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ (ਟੀ.ਐਮ) ਹੈ. ਨਿੰਦਾਕ ਬਾਈਨ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਲਈ ਸਾੱਫਟਵੇਅਰ ਟੂਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ.
ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀ ਐਨ ਏ: ਜਾਂਚ ਕਰੋ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਕਾਫ਼ੀ ਮਾਤਰਾ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰ ਰਹੇ ਹੋ. ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਕਮਜ਼ੋਰ ਜਾਂ ਕੋਈ ਸਹਾਇਕਤਾ ਨਹੀਂ ਹੋਵੇਗਾ.
ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਇਨਿਹਿਬਟਰਜ਼: ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਗੰਦਗੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦੀ ਹੈ. ਆਪਣੇ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਜਾਂ ਕਿਸੇ ਵੱਖਰੀ ਐਕਸਟਰਕਸ਼ਨ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਬਾਰੇ ਵਿਚਾਰ ਕਰੋ.
ਹੱਲ: ਆਪਣੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰੋ, ਟੈਂਪਲੇਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਧਾਓ, ਅਤੇ ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ ਤੁਹਾਡੇ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਰੋਕਥਾਮਾਂ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ.
2. ਮੇਰਾ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਗਲਤ ਅਕਾਰ ਕਿਉਂ ਹੈ?
ਜੇ ਤੁਹਾਡਾ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦਾ ਆਕਾਰ ਉਮੀਦ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਹ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਜਾਂ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਂਦੀਆਂ ਸਮੱਗਰਾਂ ਨਾਲ ਸਮੱਸਿਆ ਦਾ ਸੰਕੇਤ ਦੇ ਸਕਦਾ ਹੈ.
ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਸਹਾਇਕਫਿਕੇਸ਼ਨ: ਇਹ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ ਜੇ ਕੋਈ ਪ੍ਰਾਈਮ ਇੱਕ ਬੇਲੋੜੀ ਸਾਈਟ ਤੇ ਬੰਨ੍ਹਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ. ਇੱਕ ਟੂਲ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਧਮਾਕੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰੋ.
ਗ਼ਲਤ ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ: ਜੇ ਐਂਡੀਜਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਹੈ, ਤਾਂ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬਾਈਡਿੰਗ ਦਾ ਨਤੀਜਾ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ. ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਪੀਸੀਆਰ ਦੁਆਰਾ ਏਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਦਾ ਅਨੁਕੂਲਤਾ.
ਹੱਲ: PCR ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਅਨੁਕੂਲਤਾ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਓ.
3. ਮੇਰਾ ਪੀਸੀਆਰਜੀਐਲ ਇੱਕ ਗਲਤੀ ਸੁਨੇਹਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ. ਮੈਨੂੰ ਕੀ ਕਰਨਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ?
ਪੀਸੀਆਰ ਐਨਾਲਾਈਜ਼ਰ 'ਤੇ ਗਲਤੀ ਸੁਨੇਹੇ ਚਿੰਤਾਜਨਕ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਉਹ ਅਕਸਰ ਸੰਭਾਵਿਤ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਦੇ ਸੁਰਾਗ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ.
ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਦੇ ਮੁੱਦੇ: ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰਐਲਏਐਲਏਐਲਏਐਲਐਸ ਨੂੰ ਸਹੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੈਲੀਬਰੇਟ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ. ਸਹੀ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਨਿਯਮਤ ਰੱਖ-ਰਖਾਅ ਅਤੇ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਜਾਂਚਾਂ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹਨ.
ਸਾੱਫਟਵੇਅਰ ਸਮੂਹ: ਕਈ ਵਾਰ, ਸਾੱਫਟਵੇਅਰ ਬੱਗ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ. ਆਪਣੇ ਕੰਪਿ computer ਟਰ ਨੂੰ ਮੁੜ ਚਾਲੂ ਕਰੋ ਅਤੇ ਸਾਫਟਵੇਅਰ ਅਪਡੇਟਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰੋ.
ਹੱਲ: ਖਾਸ ਗਲਤੀ ਕੋਡ ਲਈ ਉਪਭੋਗਤਾ ਮੈਨੂਅਲ ਵੇਖੋ ਅਤੇ ਸਿਫਾਰਸ਼ੀ ਸਮੱਸਿਆ-ਨਿਪਟਾਰਾ ਕਦਮਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰੋ. ਨਿਯਮਤ ਦੇਖਭਾਲ ਕਈ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਰੋਕ ਸਕਦੀ ਹੈ.
4. ਮੇਰੇ ਪੀਸੀਆਰਐਸ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਅਸੰਗਤ ਕਿਉਂ ਹਨ?
ਅਸੰਗਤ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਕਈ ਕਾਰਨਾਂ ਕਰਕੇ ਨਿਰਾਸ਼ਾਜਨਕ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ:
ਰੀਜੈਂਟ ਕੁਆਲਟੀ: ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ ਐਂਜ਼ਾਈਮਜ਼, ਬਫਰ, ਅਤੇ ਡੰਡੇ ਸਮੇਤ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਤਾਜ਼ੇ ਅਤੇ ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਹਨ. ਮਿਆਦ ਪੁੱਗ ਗਈ ਜਾਂ ਦੂਸ਼ਿਤ ਰੀਜੈਂਟਸ ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦੇ ਹਨ.
ਥਰਮਲ ਸਾਈਕਲਰ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ: ਅਸੰਗਤ ਤਾਪਮਾਨ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ. ਸ਼ਰਮਲ ਸਾਈਕਲਰ ਦੀ ਕੈਲੀਬਰੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਨਿਯਮਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਾਂਚ ਕਰੋ.
ਹੱਲ: ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਰੀਜੈਂਟਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ ਅਤੇ ਇਕਸਾਰ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਆਪਣੇ ਥਰਮਲ ਸਾਈਕਲ ਕੈਲੀਬਰੇਟ ਕਰੋ.
5. ਪੀਸੀਆਰ-ਰੀਕਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਕਿਵੇਂ ਬਣਾਈਏ?
ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰਨਾ ਵਧੇਰੇ ਪੈਦਾਵਾਰ ਅਤੇ ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ.
ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਦੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਓ: ਪ੍ਰਾਈਮਰਜ਼, ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀ ਐਨ ਏ ਅਤੇ ਐਮਜੀਐਸਐਲ 2 ਦੀ ਵੱਖ ਵੱਖ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਕਰੋ. ਹਰੇਕ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਲਈ ਵਿਲੱਖਣ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ.
ਉੱਚ ਪੱਧਰੀ ਪਾਚਕ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ: ਜੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਹੈ, ਤਾਂ ਅਸਪਸ਼ਟਤਾ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਗਲਤੀਆਂ ਨੂੰ ਘੱਟ ਤੋਂ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ ਉੱਚ-ਵਫ਼ਾਦਾਰੀ ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮਰੇਜ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਿਆਂ ਵਿਚਾਰ ਕਰੋ.
ਹੱਲ: ਆਪਣੇ ਖਾਸ ਪੀਸੀਆਰ ਸੈਟਅਪ ਲਈ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਹਾਲਤਾਂ ਲੱਭਣ ਲਈ ਇੱਕ ਓਪਟੀਮਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਯੋਗ ਕਰੋ.
ਸਾਰੰਸ਼ ਵਿੱਚ
ਸਮੱਸਿਆ ਨਿਪਟਾਰਾ ਏਪੀਸੀਆਰਐਲਏਜ਼ਰਇੱਕ ਮੁਸ਼ਕਲ ਕੰਮ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਆਮ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਹੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸਮਝਣਾ ਤੁਹਾਡੇ ਪੀਸੀਆਰ ਤਜ਼ਰਬੇ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵਧਾ ਸਕਦਾ ਹੈ. ਇਨ੍ਹਾਂ ਆਮ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਦੇ ਹੱਲ ਲਈ, ਖੋਜਕਰਤਾ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਸੁਧਾਰਨਾ ਅਤੇ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਵਿੱਚ ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾ ਸਕਦੇ ਹਨ. ਨਿਯਮਤ ਦੇਖਭਾਲ, ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੀ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਚੋਣ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦਾ ਅਨੁਕੂਲਕਰਨ ਸਫਲ PCR ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀਆਂ ਕੁੰਜੀਆਂ ਹਨ.
ਪੋਸਟ ਸਮੇਂ: ਅਕਤੂਬਰ-1-2024
ਗੋਪਨੀਯਤਾ ਸੈਟਿੰਗਜ਼